Sistema de Extraccion Magnetica
En el primer paso de extracción la muestra que contiene virus ARN es lisada mediante incubación en la Solución Lisis-Unión RNA 3.0 (SLU-RNA 3.0) rica en detergentes iónicos y agentes caotrópicos que permite la lisis celular y la desnaturalización de las proteínas, liberando así el ARN4 . De igual manera contiene agentes que inhiben las RNasas presentes en las muestras biológicas y estabilizan el ARN.
La adición posterior de Solución de Precipitación RNA 3.0 (SPRNA 3.0) a la muestra lisada crea las condiciones adecuadas para la unión del ARN a las nanopartículas NESP-A380 incluida en el kit. Este paso de unión es reversible y específico para cada tipo ácido nucleico, y depende de la Solución Lisis-Unión RNA 3.0 utilizada (SLU- RNA 3.0).
El Carrier RNA contenido en la SLU-3.0, unido a las NESP-A380 mejora la unión y el rendimiento en muestras diluidas o con baja concentración de ARN viral. Los contaminantes presentes en la muestra (sales, metabolitos, componentes celulares solubles) son eliminados mediante sucesivos lavados del ARN unido a las NESP-A380 con las Soluciones de Lavado (SLV-1, 2 y 3). Las NESP-A380 se secan para eliminar restos de las SLV y el ARN es finalmente eluido en la Solución de Elución RNA 3.0 (SE-RNA 3.0) que contiene baja concentración de sales específicas y compuestos que garantizan una máxima lixiviación y estabilización del ARN.
Instrucciones de Almacenamiento
¡IMPORTANTE! - La solución SLU RNA 3.0 contiene sales que pueden irritar la piel y las mucosas, utilice guantes y gafas de protección durante su manipulación. Los reactivos incluidos en el kit pueden almacenarse a temperatura ambiente (15-40 °C) hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del envase externo.
¡IMPORTANTE! - antes de utilizar la solución de NESP-A380, homogenizar constante y enérgicamente, rotando el frasco antes de adicionar a cada pocillo. NO DAR VÓRTE
¡IM PORTANTE!: No almacenar ninguno de los componentes del estuche a temperaturas superiores a 40 °C. La degradación se acelerará si se conserva incorrectamente, se incuba a temperaturas >80 °C, o se prolonga el tiempo de incubación a 50 °C durante la lisis a más de 15 min. La degradación reduce el rendimiento de la extracción y puede producir falsos negativos en la RT-PCR, en particular si se trabaja con muestras con una carga viral baja. No almacenar a temperaturas inferiores a 25 °C, puesto que en el SLU-RNA 3.0 pueden aparecer precipitados de sales que pueden interferir con el proceso de extracción. No obstante, desaparecen al calentar a 37 °C. NO REFRIGERAR.